主笔：于浩

临时性细菌、酵母菌株保存

一、实验准备

1、40%GlySalt

2、灭菌后的1.5 mL离心管

二、注意事项

• 该方法适合临时性的短期的菌株保藏，保存时间不宜超过半年。

三、实验步骤

1、向离心管中加入0.6 mL的菌液和0.4 mL的40%GlySalt。

2、将离心管在室温放置10 min，放入-20摄氏度进行保存。

细菌、酵母菌株保存（甘油管法）

一、实验准备

1、15%GlySalt

2、灭菌后的2 mL冻存管

二、注意事项

• 该方法保存时间较长，为2-5年，根据细菌种类不同而不同。
• 珍贵的菌株最好用真空干燥的方法进行保藏，利用甘油管法保存的菌株最好每3-5年活化一次。

三、实验步骤

1、将需要保存的菌株划单菌落，挑取单菌落到50 mL的LB培养基中，如果有需要则加入特定的抗性。

2、取6 mL菌液加入到灭菌后的洁净的10 mL的离心管中，5000 rpm离心2 min，将上清培养基丢弃。

3、加入1.5 mL的灭菌后的15%GlySalt重悬菌体沉淀。

4、将离心管在室温放置10 min（不超过半小时），冻存管上面做好标记（时间、菌株名称）。

5、放入-80摄氏度冰箱进行保存，在菌株保藏系统做好登记。