注意事项

大家使用的时候从公共试剂处取用，用多少拿多少，使用完毕后放到自己冰箱，不得将使用后的放回公共冰箱。

用多少拿多少，自己冰箱里面不得存放超过2支的量。

如果发现公共冰箱中抗生素数量不足，跟负责试剂的同学说一下，按照公共试剂配置规范来进行配置，并进行登记。

抗生素配置

Amp100（氨苄青霉素，ampicillin，Amp）

常用工作浓度：100 μg/mL

配置储存液浓度：100 mg/mL（1000×）

储存液配置：☛

准确称取3.0 g氨苄青霉素钠盐加入到洗干净的50 mL离心管中，加入30 mL超纯水，利用生工0.22 μm滤膜进行过滤除菌。

分装成1 mL/管 小份，于-20 °C贮存。

小离心管标记方法如下：

离心管正面：Amp100

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

Kan50（卡那霉素，kanamycin，Kan）

常用工作浓度：50 μg/mL

配置储存液浓度：50 mg/mL（1000×）

储存液配置：☛

准确称取1.5 g卡那霉素加入到洗干净的50 mL离心管中，加入30 mL超纯水，利用生工0.22 μm滤膜进行过滤除菌。

分装成1 mL/管 小份，于-20 °C贮存。

小离心管标记方法如下：

离心管正面：Kan50

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

Rif50（利福平，Rifampicin，Rif）

常用工作浓度：50 μg/mL

配置储存液浓度：50 mg/mL（1000×）

储存液配置：☛

超净台中：0.5 g Rif 溶于10 mL DMSO（二甲基亚枫）

分装至1.5 mL灭菌离心管中，每管分装0.5 mL，用铝箔包裹装液管以免溶液见光，保存于-20℃。

小离心管标记方法如下：

离心管正面：Rif50

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

铝箔纸外面标记：R

CPL25（氯霉素，chloramphenico，CPL）

常用工作浓度：25 μg/mL

配置储存液浓度：25 mg/mL（1000×）常以12.5 ug/ml～25 ug/ml的终浓度添加于生长培养基

储存液配置：☛

准确称取0.25 g氯霉素，加入洗干净的15 mL离心管中，加入10 mL无水乙醇，无需过滤，超净台中操作。

分装成0.5 mL小份，于-20°C贮存。

小离心管标记方法如下：

离心管正面：CPL25

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

Tet20（四环素，tetracyyline，Tet）

常用工作浓度：20 μg/mL

配置储存液浓度：20 mg/mL（1000×）常以10 ug/ml～50 ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

储存液配置：☛

溶解0.4 g 盐酸四环素加入到洗干净的50 mL离心管中，加入20 mL 70%乙醇，利用生工0.22 μm滤膜进行过滤除菌。

分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20 °C贮存，每管0.6 mL。

小离心管标记方法如下：

离心管正面：Tet20

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

生化试剂

1 M IPTG溶液

IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238.3）

【1 M母液配制方法】：在10 ml蒸馏水中溶解2.4 g IPTG后，用0.22 μm针式滤器过滤除菌，分装成1 mL小份贮存于-20°C。

标记方法如下：

离心管正面：1 M IPTG

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

AS100（乙酰丁香酮，Acetosyringone，AS）

储存温度：-20℃

配置储存液浓度：100 mM（500×），常用工作浓度：0.2 mM

储存液配置：☛

准确称取196.2 mg AS，用5 mL二甲基亚砜（DMF）直接溶解，并定容至10 mL，分装0.5 mL/管，于-20℃保存。

标记方法如下：

离心管正面：AS100

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

1 M MES（pH 5.6）(25x)

称取42.6 g MES，加入到烧杯中，加入180 mL水，用HCl或NaOH调节pH为5.6，过滤除菌。分装到10 mL的灭菌后的离心管中，-20摄氏度保存。

蛋白酶K10（10 mg/mL蛋白酶K溶液）

储存温度：-20℃

配置方法：准确称取5 mg蛋白酶K粉末加入到1.5 mL离心管中，加入灭菌后的0.5 mL超纯水将蛋白酶K溶解。

做标记：

离心管正面：蛋白酶K10

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

放到-20摄氏度公共试剂区域

X-gal20（20 mg/mL X-gal溶液）

储存温度：-20℃，铝箔纸包裹避光保藏

配置方法：

准确称取0.1 g X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷）粉末加入到洗干净的10 mL离心管中，加入5 mL二甲基甲酰胺（NFM）溶解，配置成20 mg/mL的贮存液（1000×）。

利用0.22 μm针式滤器过滤除菌，分装成0.5mL小份，用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，贮存于-20°C。

做标记：

离心管正面：X-gal20

离心管侧面：配置人缩写+配置年月

放到-20摄氏度公共试剂区域

400 mg/L 生物素

准确称取8 mg生物素，溶于20 ml超纯水中，于超净台中用无菌的0.22μm的水相滤膜过滤至灭菌后的1.5 ml离心管中，-20℃保存。